蛋白胨的生化指標(biāo)是指在平時試驗(yàn)中的測定的一些指數(shù),下面我們就來介紹一下:
1、糖發(fā)酵試驗(yàn):稱取胨2.0g、NaCL 0.5g、酚紅0.002g、蒸餾水或去離子水100ml,配制溶液,調(diào)節(jié)其pH值7.2~7.4,以每管6.0ml分裝,115℃/15min高壓滅菌,接種大腸埃希氏桿菌的18~24h的新鮮培養(yǎng)物,35±2℃培養(yǎng)18~24h觀察結(jié)果,應(yīng)為陰性,即培養(yǎng)基顏色應(yīng)為橙紅色。培養(yǎng)基顏色變成黃色報告陽性。
2、H2S試驗(yàn):稱取胨1.0g,加100ml的蒸餾水或去離子水配制成1.0%的胨水,以每管6ml分裝,121℃/15min高壓滅菌,接種傷寒沙門氏菌的18~24h的新鮮培養(yǎng)物,將PbAc試紙插入試管中,試紙下段距離液面2~3cm,蓋好試管蓋。30~35℃培養(yǎng)24~48h,觀察結(jié)果,PbAc試紙條的黑色域不得小于0.5cm。
3、靛基質(zhì)(吲哚)試驗(yàn):稱取胨1.0g,加100ml的蒸餾水或去離子水配制成1.0%的胨水,以每管6ml分裝,121℃/15min高壓滅菌,分別接種大腸埃希氏桿菌、傷寒沙門氏菌的18~24h的新鮮培養(yǎng)物,35±2℃培養(yǎng)18~24h。觀察結(jié)果時每管加入4~5滴入靛基質(zhì)試劑,大腸埃希氏桿菌應(yīng)為陽性,10s內(nèi)液面上出現(xiàn)玫瑰紅色環(huán),傷寒沙門氏菌呈陰性。
4、V-P試驗(yàn):稱取胨0.7g、葡萄糖0.5g、NaCl 0.5g,加100ml蒸餾水或去離子水配制溶液,調(diào)節(jié)其pH7.2~7.4,以每管6ml分裝115℃/15min高壓滅菌,分別接種產(chǎn)氣腸桿菌(如45103)、大腸埃希氏桿菌(如44104)的18~24h的新鮮培養(yǎng)物,35±2℃培養(yǎng)18~24h。觀察結(jié)果時,除去試管帽,依次加入VP試劑甲、乙液, 甲乙液比例:3/1,加入的量甲液9滴,乙液3滴;之后放置36℃培養(yǎng)箱孵育,30min內(nèi)接種產(chǎn)氣腸桿菌的管中出現(xiàn)紅色的為陽性反應(yīng),大腸桿菌的呈陰性反應(yīng)。
5、生長試驗(yàn):配制培養(yǎng)基:2.0g胨、0.5gNaCl、1.5g的瓊脂,加入到100mL蒸餾水或去離子水中,加熱完全溶解,調(diào)節(jié)pH值7.2~7.4,121℃/15min高壓滅菌,待溫度降到50℃左右時傾注平板,接種100~1000cfu/ml的金黃色葡萄球菌和大腸埃希氏桿菌,35±2℃培養(yǎng)18~24h觀察結(jié)果,應(yīng)生長良好。接種的金黃色葡萄球菌和大腸桿菌是通過比濁的方法稀釋到-7和-8,接種量為1ml,每個稀釋度需作兩塊平板,要求-7平板上生長菌落100左右。
6、色素試驗(yàn):配制培養(yǎng)基:2.0g胨、0.5gNaCl、1.5g的瓊脂, 加入到100mL蒸餾水或去離子水中,加熱完全溶解,調(diào)節(jié)pH值7.2~7.4,121℃/15min高壓滅菌,待溫度降到50℃左右時傾注平板, 充分凝固后,劃線(四區(qū)劃線接種的方式)接種金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞桿菌的新鮮培養(yǎng)物,35±2℃培養(yǎng)18~24h觀察結(jié)果,均應(yīng)四區(qū)均生長,接種金黃色葡萄球菌的平板上有黃色色素生成,接種銅綠假單胞桿菌的平板上有綠色色素生成。
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